畜牧与兽医２０１３年第４５卷第３期・３９・日粮中添加不同水平苜蓿皂甙对滩羊瘤胃挥发性脂肪酸的影响王洁，周玉香＋，吉帅，侯鹏霞，眭丹，李艳（宁夏大学农学院动物科学系，宁夏银川７５００２１）摘要：本试验采用体外培养法研究了在以３：７为精粗比的日粮条件下添加苜蓿皂甙对滩羊瘤胃挥发性脂肪酸的影响。苜蓿皂甙的添加水平为Ｏ（对照组）、０．５％（试验Ｉ组）、１．０％（试验Ⅱ组）、２．０％（试验Ⅲ组）、３．Ｏ％（试验ＩＶ组）。结果表明：添加ｌ，Ｏ％的苜蓿皂甙，瘤胃培养液的丙酸浓度呈现持续上升的趋势（Ｐ＞０．０５）；添加量为３．０％时，其丙酸浓度分别在３、１２和１８ｈ时与对照组差异极显著（Ｐ＜０．０１）；添加１．０％、３．０％的苜蓿皂甙，瘤胃培养液的乙酸浓度呈现持续上升的趋势；各添加水平下瘤胃培养液总的挥发性脂肪酸的浓度在一定时间内均呈现不同程度的上升趋势（Ｐ＞０．０５），但其乙酸／丙酸值却呈现下降趋势（Ｐ＞０．０５）。综观各添加水平苜蓿皂甙对滩羊瘤胃挥发性脂肪酸的影响结果。添加３．０％的苜蓿皂甙最为适宜。关键词：体外培养；苜蓿皂甙；挥发性脂肪酸；滩羊；瘤胃中图分类号：￥８５２．２文献标志码：Ａ文章编号：０５２９－５１３０（２０１３）０３・００３９—０３苜蓿皂甙是从天然苜蓿植株中提取的具有独特生物活性的物质，是由糖中羟基或非糖类化合物的羟基以缩醛链（甙链）脱水缩合而成的环状缩醛物，具独特的生物学性质，有多种药理活性，可以降低血液中胆固醇和抗动脉粥样硬化，防治心血管疾病，抗菌消炎、抗诱变、抗肿瘤、提高机体免疫力等一系列重置进行试验。培养液及缓冲液配制参照文献［８］的方法进行。表１试验日粮组成及营养水平（干物质）原料青贮干草玉米豆粕麸皮葵花饼预混料配比／％３４．４５指标营养水平要的生物学功能【ｌ。４１；同时还可作为天然的食品添加３１，３２代谢能／（ＭＪ・ｋｇ“）８．４０粗蛋白质／％１６．２２剂，能促进动物对营养物质的消化吸收，提高其生产性能，改善畜产品品质等＂Ｊ。瘤胃发酵产生的挥发性脂肪酸（ＶＦＡ）是反刍动物重要的能量来源，约占反刍动物能量吸收总量的７０％一８０％。因此，评定ＶＦＡ产量及比例对进一步１８．７９钙／％０．７７磷／％０．４３９．２８１．７７１．０４提高反刍动物能量利用率研究具有重要的意义‘６。７１。３．１３１材料与方法１．１试验设计与处理称取２．０ｇ精粗比３：７的日粮作为培养底物，食盐０．２０１．３瘤胃液的采集根据日粮中苜蓿皂甙添加水平的不同分成５组：其添加水平为０（对照组）、０．５％（试验Ｉ组）、１．０％（试验Ⅱ组）、２．０％（试验Ⅲ组）、３．０％（试验ＩＶ组），每个添加水平均设３个重复。在培养瓶中，分晨饲（８：００）前２ｈ由滩羊瘤胃内上下左右不同位点采集足量瘤胃液，灌入经预热达３９℃并通有ＣＯ，的保温瓶中，灌满后立即盖严瓶口，迅速返回实验室，经４层尼龙布过滤后持续通人ＣＯ：气体５ｍｉｎ，别添加缓冲液４０ｍＬ，瘤胃液２０ｍＬ。混合均匀后置３９然后迅速分装至上述已预热好并通有ＣＯ：的培养瓶内（每个培养瓶加２０ｍＬ瘤胃液）。接通培养瓶和注射ｃｃ恒温水浴摇床上进行３、６、１２、１８和２４ｈ体外批次培养。日粮配方见表ｌ。１．２体外培养操作采用主体为ＨＺＳ．Ｈ水浴振荡器，带有培养瓶、塑料三通、医用玻璃注射器等组成的体外批次培养装收稿日期：２０１１一１１—１０；修回日期：２０１２一１１・１０作者简介：王洁（１９８４－），女，硕士研究生。＋通信作者：周玉香，博士，教授，研究方向为动物营养与饲料科学，Ｅ—ｍａｉｌ：ｚｈ”＠ＮＸＵ．ｅｄｕ．ｅｎ。器，打开振荡开关，开始培养。１．４测定指标与方法ＶＦＡ测定：用日本岛津ＧＣ－７Ａ气相色谱仪依内标法进行测定。内标物为巴豆酸。取瘤胃液１０ｍＬ在３５００ｒ／ｍｉｎ下，离心１５ｍｉｎ，取上清液４ｍＬ加入２５％偏磷酸与甲酸按３：ｌ配制的混合液ｌｍＬ，静置４０ｍｉｎ后，取１ｍＬ混合液加入２ｇ酸性吸附剂（Ｎａ２Ｓ０４：５０％Ｈ２Ｓ０４：硅藻土［ｗ／Ｖｌ＝３０：１：２０）和４０ｍＬ巴豆酸溶液（３１．２５ｍｍｏｌ／Ｌ，溶剂为万方数据・４０・ＡｎｉｍａｌＨｕｓｂａｎｄｒｙ＆ＶｅｔｅｒｉｎａｒｙＭｅｄｉｃｉｎｅ２０１３Ｖ０１．４５Ｎｏ．３ＣＨ，ＣＬ，），摇匀，澄清后上机测定。色谱条件：色谱柱为不锈钢柱，担体为１０％的ＦＦＡＰ（聚乙醇２０ｍＬ与２一硝基对苯二甲基的反层物）加１％Ｈ，ＰＯ。的ＣｈｒｏｍｏｓｏｂＷ。柱温１５０℃，汽化室２结果与分析２．１苜蓿皂甙对瘤胃丙酸浓度的影响由表２可见，在精粗比为３：７Ｅｔ粮条件下，３和１８ｈ时试验ＩＶ组与对照组、试验Ｉ、Ⅱ、Ⅲ组相比丙酸浓度差异显著或极显著（Ｐ＜０．０１）；６ｈ时试温度为２３０℃，空气压力为０．３５ｋｇ／ｃｍ２，流量１４０ｍＬ／ｍｉｎ；氢气压力为１．２ｋｇ／ｃｍ２，流量为１４ｍＬ／ｍｉｎ，Ｎ２（载体）流量５５ｍＬ／ｍｉｎ。进样量１¨Ｌ。１．５数据处理采用ＳＡＳ６．１２软件中的ＡＮＯＶＡ进行方差分析，进行多重比较，数据以“平均值４－标准差”表示。验ＩＶ组与试验Ⅱ组差异显著（Ｐ＜０．０５），其余各添加组之间差异不显著（Ｐ＞０．０５）；１２ｈ时试验Ⅱ、Ⅲ和ＩＶ组与对照组、试验Ｉ组相比差异极显著（Ｐ＜０．０１）；２４ｈ时各添加组之间没有显著差异（Ｐ＞０．０５）。表２３：７日粮条件下添加不同水平的苜蓿皂甙对瘤胃丙酸浓度的影响ｍｍｏｌ／Ｌ注：同列数据肩标不Ｎｄ，写字母表示差异显著（Ｐ＜０．０５），不同大写字母表示差异极显著（Ｐ＜０．０１），字母相同或无字母者表示差异不显著（Ｐ＞０．０５）。下同。２．２苜蓿皂甙对瘤胃乙酸浓度的影响以３：７为精粗比的日粮条件下，各添加组的乙酸浓度在３ｈ至１８ｈ时表现一致，均呈上升趋势；在表３２４ｈ时对照组、试验Ｉ组和试验Ⅲ组呈现下降趋势。但在各培养时间点，各添加组之间均没有显著差异性（Ｐ＞０．０５）（表３）。３：７日粮条件下添加不同水平的苜蓿皂甙对瘤胃乙酸浓度的影响ｍｍｏｌ／Ｌ２．３苜蓿皂甙对瘤胃乙酸／丙酸值的影响乙酸／丙酸值随时间的延长呈现下降趋势，前６ｈ缓（表４）。对照组、试验Ｉ组和试验Ⅱ组在６ｈ到１２ｈ时，下降幅度较大，１２ｈ后其下降幅度较乎缓，下降幅度较大些，从６ｈ开始到２４ｈ，下降幅度较平表４组别对照３ｈ１．６５±０．０２１．５４±０．０９１．６０土０．１ｌ１．６６±０．１６１．７５±０．０８其余添加组从６ｈ开始，下降幅度均较平缓。３：７日粮条件下添加不同水平的苜蓿皂甙对瘤胃乙酸／丙酸值的影响６ｈ１２ｈ１８ｈ２４ｈ１．５２＋０．０８”１．３３＋０．１８”１．５２土０．０４”１．５３±０．１４。１．４８±０．０１”１．４９±０．１３“１．３７±０．０２“１．４３±Ｏ．０６”１．４８±０．００”１．４６±０．００。１．２９＋０．１６。１．２７＋０．００ａｂ１．２５±０．Ｏｌ１．３６±０．０３１．４６±０．１５３试验Ｉ试验ＩＩ试验Ⅲ试验ＩＶ１．２１士Ｏ．０２ｂ１．３８±ｏ．１７ａ６１．４５±０．１０ａ１．３９士０．０２ａ６８ａ１．４２±０．０２６万方数据畜牧与兽医２０１３年第４５卷第３期２．４苜蓿皂甙对瘤胃丁酸浓度的的影响时，试验Ｉ组的丁酸浓度仍为上升趋势，其他的添加从表５可以看出，在前１８ｈ各试验组的丁酸浓组略有下降趋势。各试验组之间丁酸浓度差异不显著度都呈现上升的趋势，且上升的幅度较大，在２４ｈ（Ｐ＞０．０５）。表５３：７１３粮条件下添加不同水平的苜蓿皂甙对瘤胃丁酸浓度的影响ｍｍｏｌ／Ｌ２．５苜蓿皂甙对瘤胃总ＶＦＡ浓度的的影响势比较明显。３ｈ时试验Ｉ组与试验ＩＶ组分别与对照以３：７为精粗比的１３粮条件下，表６可以看出，组差异显著（Ｐ＜０．０５），且与其他添加组差异不显著添加不同水平的苜蓿皂甙对瘤胃总ＶＦＡ浓度的影响（Ｐ＞０．０５），在其他时间点各添加水平对瘤胃总ＶＦＡ与其对瘤胃丁酸浓度的影响相同。在前面的１２ｈ时，浓度的的影响变化趋势虽不同，但是各试验组之间差其上升趋势比较平缓，１２～１８ｈ这个阶段其上升趋异不显著（Ｐ＞０．０５）。表６３：７日粮条件下添加不同水平的苜蓿皂甙对瘸胃总ＶＦＡ浓度的影响ｍｍｏｌ／Ｌ３讨论黄胆固醇含量影响的研究【Ｊ］．草业学报，２００５，１４（２）：７６．８３．反刍动物瘤胃中ＶＦＡ的含量及组成比例是反映［３］何云，李明风，王成章，等．苜蓿草粉对黄河鲤鱼生长性能及着色的影响［Ｊ］．草地学报，２００８（４）：４２２．４２７．瘤胃消化代谢的重要指标，瘤胃发酵所产生的挥发性［４］樊文娜，王成章，史鹏飞，等．苜蓿皂甙的研究应用进展脂肪酸是反刍动物重要的能量来源。评定ＶＦＡ的产［Ｊ］．草业科学，２００８，２５（１１）：６５—６９．量及比例，对进一步提高能量利用率研究具有重要意［５］张建刚，李文婷，陆银，等．苜蓿的生物活性成分及在养鸡生义。日粮中添加不同水平苜蓿皂甙对绵羊瘤胃丙酸含产中的应用进展［Ｊ］．饲料广角，２０１ｌ（６）：３７－３８．量产生了影响。有试验表明在添加１％～４％的苜蓿［６］ＨｕｗＬ，ＷｕＹＭ，ＬｉｕＪｘ，ｅｔａ１．Ｔｅａｓａｐｏｎｉｎｓａｆｆｅｃｔｉｎｖｉｔｒｏｆｅｒ－ｍｅｎｔａｔｉｏｎａｎｄｍｅｔｈａｎｏｇｅｎｅｓｉｓｉｎｆａｕｎａｔｅｄａｎｄｄｅａｕｎａｔｅｄｎｌｍｅｎｆｌｕｉｄ皂甙时，试验各组乙酸、丙酸含量均高于对照组；同［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＺｈｅｊｉａｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＳｃｉｅｎｃｅ，２００５，６３（８）：时降低了其乙酸／丙酸的值∽Ｊ。本试验条件下添加苜７８７－７９２．蓿皂甙后各试验组丙酸含量均高于对照组；降低了乙［７］苗朝华，莫放，岳文斌，等．微量元素钴对人工瘤胃挥发性脂酸／丙酸的值，改变了发酵模式，提高了反刍动物对肪酸产生量的影响［Ｊ］．动物营养学报，２００８，２０（５）：发酵终产物的利用率，这与Ｗｉｎａ等¨驯的报道相５２２－５２６．一致。［８］张爱忠．酵母培养物对内蒙古绒山羊瘤胃发酵及其它生理功能调工作用的研究［Ｄ］．呼和浩特：内蒙古农业大学，２００５：２５．２８．参考文献：［９］王雅倩，赵国琦，闫韩韩，等．利用体外法研究不同水平苜蓿皂苷对山羊瘤胃内ｐＨ值和挥发性脂肪酸的影响［Ｊ］．饲料工［１］ＣｈｅｅｋｅＰＲ，ＰｉａｃｅｎｔｅＳ，ＯｌｅｓｚｅｋＷ．Ａｎｔｉ－ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙａｎｄａｎｔｉ－ａｒ—业，２００９，３０（３）：３４－３７．ｔｈｒｉｔｉｃｅｆｆｅｃｔｓｏｆＹｕｃｃａｓｃｈｉｄｉｇｅｒａ：ａｒｅｖｉｅｗ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＩｎｆｌａｍ—［１０］ＷｉｎａＥ，ＭｕｅｔｚｅｌＳ，ＢｅｃｋｅｒＫ．Ｔｈｅｉｍｐａｃｔｏｆｓａｐｏｎｉｎｓｏｒｓａｐｏｎｉｎｍａｒｉｏｎ，２００６：３－６．ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｐｌａｎｔｍａｔｅｆｉａｔｓｏｎｒｕｍｉｎａｎｔｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ—ＡＲｅｖｉｅｗ［Ｊ］．［２］王成章，杨雨鑫，胡喜峰，等．不同苜蓿草粉水平对产蛋鸡蛋ＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌａｎｄＦｏｏｄＣｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００５，５３：８０９３—８１０５．万方数据
