药物鉴定 气相色谱法测定六神丸中麝香酮含量 ２０１０年第１９卷第２ｌ期 吕霞 ，郭青 ，钟文英 （１．江苏联合职业技术学院连云港中医药分院，江苏连云港 ２２２００６； ２．江苏省食品药品检验所，江苏南京 ２１０００８； ３．中国药科大学，江苏南京 ２１０００９） 摘要：目的建立测定六神丸中麝香酮含量的气相色谱法。方法样品用乙酸乙酯浸渍提取后进样，采用ＨＰ ５０＋石英毛细管色谱柱 （３０ ｍ×０．５３ ｍ／ｎ，１ ｔｘｍ），以Ｎｚ为载气，柱温１６５℃，进样口温度１５０ ｏＣ，火焰离子化检测器温度１９０℃。结果麝香酮质量浓度在２３．９Ｏ １ １９５，００ ｐ，ｇ／ｍＬ范围内与峰面积线性关系良好（ｒ＝０．９９９ ７），麝香酮的平均回收率为９９．１６％，ＲＳＤ为１．０４％（ｎ＝９）。结论气相色谱法 简单、准确，可用于六神丸的质量控制。 关键词：气相色谱法；六神丸；麝香酮；含量测定 中图分类号：Ｒ２８４．１；Ｒ２８６．０ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００６—４９３１（２０１０）２１—００２４—０２ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉ仰Ｏｆ Ｍｕｓｃｏｎｅ ｉｎ Ｌｉｕｓｈｅｎ Ｐｉｌｌｓ ｂｙ ＧＣ Ｌｉｚ Ｘｉａ ，Ｇｕｏ Ｑｉｎｆ，Ｚｈｏｎｇ Ｗｅｎｙｉｎｆ ｆ Ｌｉａｎｙｕｎｇａｎｇ Ｔｒａｄｉｔｗｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｅ Ｂｉｎａｎｃｈ，Ｊｉａｎｇｓｕ Ｕｎｉｏｎ Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ Ｉｎｓｔｉｔ￣ｅ，Ｌｉａｎｙｕｎｇａｎｇ，Ｊｉａｎｇｓｕ，Ｃｈｉｎａ ２２２００６； ２．Ｊｉａｎｇｓｕ Ｐｒ￣ｉｎｃｍｌ ［ｎｓｔｉｔｕｔｅ ｆｏｒ Ｆｏｏｄ ａｎｄ Ｄｒｕｇ Ｃｏｎｔｒｏｌ，Ｎａｎｊｉｎｇ，Ｊｉａｎｇｓｕ，Ｃｈｉｎａ ２１０００８； ３．Ｃｈｉｎａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｉｆｎｇ，Ｊｉａｎｇｓｕ，Ｃｈｉｎａ ２１０００９） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｄｅｖｅｌｏｐ ａ ＧＣ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｕｓｃｏｎｅ ｉｎ Ｌｉｕｓｈｅｎ Ｐｉｌｌｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｔｈｅ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ ｗａｓ ｃａｒｒｉｅｄ ｏｕｔ ｏｎ ｔｈｅ ｃａｐｉｌｌａｒｙ ｃｏｌｕｍｎ（ＨＰ ５０＋，３０ ｍ×０．５３ ｍｍ，１ ｍ），ＦＩＤ ａｓ ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｏｒ，ｕｓｉｎｇ ｎｉｔｒｏｇｅｎ ａｓ ｃａｒｒｉｅｒ ｇａｓ．Ｔｈｅ ｔｅｍｐｅｒ－ ａｔｕｒｅ ｏｆ ｃｏｌｕｍｎ，ｉｎｌｅｔ ａｎｄ ｄｅｔｅｃｔｏｒ ｗａｓ ｓｅｔ ａｔ １６５ ｏＣ，１５０ ｏＣ ａｎｄ １９０ ｏＣ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ ｇｏｏｄ ｌｉｎｅａｒ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ Ｗａｓ ｅｘｈｉｂｉｔｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ｒａｎｇｅ ｏｆ ２３．９０—１ １９５．００￣ｇ／ｍＬ（ｒ＝０．９９９ ７）．Ｔｈｅ ａｖｅｒａｇｅ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｒａｔｅ ｗａｓ ９９．１６％（ＲＳＤ＝１．０４％）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｔｈｉｓ ｍｅｔｈｏｄ ｉｓ ｓｉｍｐｌｅ ａｎｄ ｒｅｌｉａｂｌｅ ｆｏｒ ｔｈｅ ｑｕａｌｉｔｙ ｃｏｎｔｒｏｌ ｏｆ Ｌｉｕｓｈｅｎ Ｐｉｌｌｓ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ＧＣ；Ｌｉｕｓｈｅｎ Ｐｉｌｌ；ｍｕｓｃｏｎｅ；ｃｏｎｔｅｎｔ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ 六神丸由麝香、蟾酥、人工牛黄等６味中药组方，属国家中药 保护品种，具有清凉解毒、消炎止痛等功效，常用于治疗烂喉丹痧、 线性关系考察：精密吸取 麝香酮对照品溶液（１．１９５ ｇ／Ｌ） １ ｍＬ，分别置２，５，１０，２０，５０ｍＬ 咽喉肿痛、喉风喉痈、ｄｘＪＬ热疖、痈疡疔疮、无名肿毒等症。本品质 量标准中含量测定仅限于人工牛黄和蟾酥，处方中主药麝香的主 要成分麝香酮只有定性鉴别项，无含量测定要求 】。笔者采用气 相色谱法测定六神丸中麝香酮含量，报道如下。 １ 仪器与试药 ＧＣ一２０１０型气相色谱仪（日本岛津）。麝香酮对照品（中国药 品生物制品检定所，批号为０８１９—２００００６）；试剂（均为分析纯）；六 量瓶中，用乙酸乙酯稀释至刻 度，吸取１ ，分别注入气相 色谱仪，测定。以进样量为横 坐标、相应峰面积为纵坐标绘 ２．５ ７ ５ ｌ２．５ Ａ 制标准曲线，回归方程为ｙ＝ ５ ０２４ ５６６Ｘ＋５５ １９ ４．ｒ＝０．９９９ ７ 神丸６批样品和麝香阴性样品（批号分别为ＥＡ１００５３．ＦＡＩＯ０３和 ＦＡＩＯ０６的样品由上海雷允上药业有限公司提供；批号分别为 （ｎ：５）。结果表明，麝香酮质量 浓度在２３．９０～１ １９５．００￣ｇ／ｍＬ ２．５ ７．５ Ｉ２，５ Ｂ ０５０５０２，０５０５０３和０５０５０４的样品及麝香阴性样品由苏州雷允上药 业有限公司提供）。 ２ 方法与结果 ２．１ 色谱条件 范围内与峰面积线性关系良 好。 精密度试验：精密吸取２．２ 项下对照品溶液，连续进样６ 次。结果麝香酮峰面积的ＲＳＤ 为０．９１％（ｎ＝６）。 Ａ．对照品溶液 ２ ５ ７ ５ ｌ２ ５ 色谱柱：ＨＰ ５Ｏ＋石英毛细管柱（３０ ｍ×０．５３ ｍｍ，１ ｍ）；柱 温：１６５ ｏＣ；进样口温度：１５０ ｏＣ；检测器温度：１９０℃；载气：Ｎ：；流速： ２ ｍＬ／ｍｉｎ；柱前压：８０ ｋＰａ；空气：４００ ｍＬ／ｍｉｎ；氢气：４０ ｍＬ／ｍｉｎ；尾 Ｃ Ｂ．供试品溶液 稳定性试验：精密吸取 ２．２项下供试品溶液１Ｏ Ｌ，分 Ｃ．阴性对照品溶液 图ｌ 气相色谱图 吹：５０ｍＬ／ｍｉｎ；分流比：２：１；进样量：ｌ Ｌ。 ２．２ 溶液配制 别在０，２，４，６，８，１０，１２，２４ ｈ时按拟订的色谱条件进样。结果峰面 积的ＲＳＤ为２．１１％（ｎ＝８），表明供试品溶液在２４ ｈ内稳定。 重复性试验：取批号为０５０４０２的样品，按２．２项下方法平行制 精密称取麝香酮对照品适量，加乙酸乙酯制成每１ ｍＬ约含 １ ｍｇ的对照品贮备液，再精密吸取适量，加乙酸乙酯稀释成与供试 品溶液浓度相当的对照品溶液（０．２３９ ０ ｇ／Ｌ）；取六神丸适量，研 细，取约０．３ ｇ，精密称定，精密加乙酸乙酯１０ｍＬ，摇匀，静置３０ｒａｉｎ， 备供试品溶液，进样测定。结果麝香酮的平均含量为４．０６６ ９ ｍｇ／ｇ， ＲＳＤ为１．６６％（ｎ＝６）。 加样回收试验：取已知含量的样品（批号为０５０４０２）约０．１５ ｇ， 滤过，取续滤液，作为供试品溶液；取阴性样品，按供试品溶液制备 法制备阴性对照品溶液。 ２．３方法学考察 系统适用性试验：取对照品、供试品、阴性对照品溶液，分别进 样１．０ Ｌ，色谱图见图１。可见，供试品溶液中麝香酮与杂质峰完全 精密称定，分别按３个水平精密加入质量浓度为０．５９７ ５ ｇ／Ｌ的麝 香酮对照品溶液０．８０，１．ｏ０，１．２０ ｍＬ，按供试品溶液制备方法平行 制备９份溶液，进样测定。结果见表１。 ２．４样品含量测定 分离，阴性对照品溶液无干扰。 ・取样品，分别按２．２项下方法制备供试品溶液，进样１ 测 ２４・ 中国药业Ｃｈｉｎａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ ２０１０年第ｌ９卷第２ｌ期 药物鉴定 反相高效液相色谱法测定复方醋酸钠注射液中醋酸钠含量 毛士龙，苗积康，吴亚利，张蓉蓉，季爱玲，朱建民 （上海市徐汇区中心医院，上海２０００３１） 摘要：目的建立测定复方醋酸钠注射液中醋酸钠含量的反相高效液相色谱法。方法采用ＩＣｓｅｐ Ｉｃｅ—Ｃｏｒｅｇｅｌ ８７Ｈ３型色谱柱，流动相为 ０．００５ ｍｏｌ／Ｌ硫酸，流速为０．６ ｍＬ／ｍｉｎ，柱温６０℃，检测波长２１０ ｎｍ。结果醋酸钠质量浓度在１．０～３．０ ｇ／Ｌ范围内与峰面积线性关系较 好，ｒ＝０．９９９ ９；平均加样回收率为１００．１８％，ＲＳＤ＝０．３ｌ％（ｎ＝６）；精密度试验的ＲＳＤ＝０．１５％（ｎ＝６）；最低检测限为９９．１５ ｎｇ。结论所 用方法简单、灵敏、准确，可作为复方醋酸钠注射液中醋酸钠含量测定的方法。 关键词：反相高效液相色谱法；复方醋酸钠注射液；醋酸钠；含量测定 中图分类号：１１９２７．２：Ｒ９７３ ．５ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００６—４９３１（２０１０）２１—００２５—０２ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ Ｓｏｄｉｕｍ Ａｃｅｔａｔｅ ｉｎ Ｃｏｍｐｏｕｎｄ Ｓｏｄｉｕｍ Ａｃｅｔａｔｅ Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ ｂｙ ＲＰ—ＨＰＬＣ Ｍａｏ Ｓｈｉｌｏｎｇ，Ｍｉａｏ Ｊｉｋａｎｇ， ｌ，ａ圮Ｚｈａｎｇ Ｒｏｎｇｒｏｎｇ，Ｊｉ Ａｉｌｉｎｇ，Ｚｈｕ ａｎｍｉｎ ｒ Ｓｈａｎｇｈａｉ Ｘｕｈｕｉ Ｄｉｓｔｒｉｃｔ Ｃｅｎｔｒａｌ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｓｈａｎｇｈａｉ，Ｃｈｉｎａ ２０００３１ Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｄｅｖｅｌｏｐ ａｎ ＲＰ—ＨＰＬＣ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｏｄｉｕｍ ａｃｅｔａｔｅ ｉｎ Ｃｏｍｐｏｕｎｄ Ｓｏｄｉｕｍ Ａｃｅｔａｔｅ Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ． Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｔｏ ａｄｏｐｔ ＩＣｓｅｐ Ｉｃｅ—Ｃｏｒｅｇｅｌ ８７Ｈ３ ａｓ ｔｈｅ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ ｃｏｌｕｍｎ，０．００５ ｍｏｌ／Ｌ ｓｕｌｐｈｕｒｉｃ ａｃｉｄ ａｓ ｔｈｅ ｍｏｂｉｌｅ ｐｈａｓｅ，ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｉｖｅ ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ ａｔ ２１０ ｎｍ，ｔｈｅ ｆｌｏｗ ｒａｔｅ ｗａｓ ０．６ ｍＬ／ｍｉｎ ａｎｄ ｔｈｅ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｗａｓ ６０ ｏＣ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ ｌｉｎｅａｒ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｒａｎｇｅ ｏｆ ｓｏｄｉｕｍ ａｃｅｔａｔｅ ｗａｓ １．０—３．０ ｇ／Ｌ（ｒ＝０．９９９ ９）．Ｔｈｅ ａｖｅｒａｇｅ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｒａｔｅ ｗａｓ １００．１８％（ＲＳＤ＝０．３１％）．Ｔｈｅ ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ ＲＳＤ ｗａｓ ０．１５％．Ｔｈｅ ｌｏｗｅｓｔ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｌｉｍｉｔａｔｉｏｎ ｗａｓ ９９．１５ ｎｇ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄ ｉｓ ｓｉｍｐｌｅ，ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ ａｎｄ ａｃｃｕｒａｔｅ，ｗｈｉｃｈ ｃａｎ ｍｅｅｔ ｔｈｅ ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓ ｆｏｒ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｏｄｉｕｍ ａｃｅｔａｔｅ ｉｎ Ｃｏｍｐｏｕｎｄ Ｓｏｄｉｕｍ Ａｃｅｔａｔｅ Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ＲＰ—ＨＰＬＣ；Ｃｏｍｐｏｕｎｄ Ｓｏｄｉｕｍ Ａｃｅｔａｔｅ Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ；ｓｏｄｉｕｍ ａｃｅｔａｔｅ；ｃｏｎｔｅｎｔ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ 醋酸钠林格注射液为临床常用的电解质酸碱平衡调节剂，其 ２．２方法学考察 部颁标准…中醋酸钠的测定方法为滴定法，采用ｐＨ变化为终点判 断方法，但终点的判定受仪器、室温、操作等因素影响，误差较大。 笔者采用反相高效液相色谱法测定复方醋酸钠注射液中醋酸钠含 量，报道如下。 专属性试验：分别量取溶剂、醋酸钠空白辅料溶液、无水醋酸 钠对照品溶液、样品溶液各１Ｏ Ｌ，注入液相色谱仪，记录色谱图。 结果表明，醋酸钠的主峰位置处无其他色谱峰，证明溶剂与辅料不 干扰醋酸根的含量测定。 １仪器与试药 Ａｇｉｌｅｎｔ １１００型高效液相色谱仪（美捷司）；ＡＢ２６５一Ｓ 型电子天平（梅特勒一托利多仪器有限公司）。无水醋酸钠 检测限确定：分别精密称取无水醋酸钠对照品，用水溶解并稀 释成系列质量浓度的溶液，注入高效液相色谱仪，记录色谱图，计 算信噪比。当主峰高约为噪音峰高的３倍时，得醋酸钠的最低检测 量为９９．１５ ｎｇ。 （Ｓｉｇｍａ—Ａｌｄｒｉｃｈ Ｆｌｕｋａ）；复方醋酸钠注射液（医院自制）。 ２ 方法与结果 耐用性试验：精密量取本品１０ （批号为０９０４０５），按含量测 ２．１ 色谱条件与系统适用性试验 色谱柱：ＩＣｓｅｐ Ｉｃｅ—Ｃｏｒｅｇｅｌ ８７Ｈ３型色谱柱；流动相：Ｏ．００５ｍｏｌ／Ｌ 硫酸；流速：０．６ ｍＬ／ｍｉｎ；柱温：６Ｏ ｏＣ；检测波长：２１０ ｎｍ。理论板数 定项下方法配制溶液并测定峰面积，柱温分别为５５，６Ｏ，６５℃，每 一温度各测定两次。结果峰面积的ＲＳＤ为０．２１％（ｎ＝６），表明方 线性关系考察：精密称取无水醋酸钠对照品５００．２１ ｍｇ，置５０ｍＬ 法耐用性较好。 以醋酸钠峰计应不低于３ ０００。 表１ 麝香酮加样回收试验结果（ｎ＝９） 高，结果基本一致。考虑到乙酸乙酯的毒性较小，故选用乙酸乙酯。 色谱条件和提取方法主要参照２００５年版《中国药典（一部）》 中麝香的含量测定方法 ，比较了ＨＰ５０＋和ＨＰ一５柱，结果ＨＰ５０＋ 柱的分离效果、峰形、理论板数较合适；还比较了浸渍提取和超声 提取两种提取方法，发现结果一致，因此选择了相对快速、简单的 浸渍提取方法，浸渍时间为３０ ｍｉｎ。含量测定结果表明，两个厂家 生产的麝香酮含量存在较大差异。 作者简介：吕霞，硕士研究生，研究方向为药物分析，（电子信 箱）ｌｖｘｉａ＿２００６＠１６３．ｃｏｎ。 参考文献： ［１］ＷＳ３一Ｂ一３３７４—９８，中华人民共和国卫生部药品标准・中药成方制剂 定，采用外标法计算含量。结果批号为０５０５０２，０５０５０３，０５０５０４， （第十八册）【ｓ】． ＥＡｌＯ０５３，ＦＡ１００３，ＦＡ１００６的样品中麝香酮含量分别为０．０１２ ７， ０．０１０ ３，０．００８ ３，０．００３ ５，０．００４ ９，０．００５ １ ｍｇ／粒（ｎ＝４）。 ３ 讨论 曾比较了苯、石油醚、无水乙醇、乙酸乙酯、甲醇５种溶剂提取 麝香酮的效果，发现乙酸乙酯和文献【ｌ一２】中苯的提取效率均较 ［２］吴银生．六神丸质量标准的研究［Ｊ］．南京中医药大学学报（自然科学 版），２００２，ｌ８（４）：２３２—２３３． ［３］国家药典委员会．中华人民共和国药典（一部）［Ｍ］．北京：化学工业出 版社。２００５：２６６． （收稿日期：２００９—１２—２９） ・中国药业Ｃｈｉｎａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ ２５・
