[19]中华人民共和国国家知识产权局
[12]发明专利申请公开说明书
[21]申请号200410065948.1
[51]Int.CI7
C05F 11/08
[43]公开日2005年8月17日[22]申请日2004.12.25[21]申请号200410065948.1
[71]申请人南通宏通生物科技有限公司
地址226007江苏省南通市学田南路附1号7楼[72]发明人王厚德 顾建洪 王明弟 王军
[11]公开号CN 1654435A
[74]专利代理机构南通市科伟专利事务所
代理人杨志京
权利要求书 1 页 说明书 7 页
[54]发明名称
复合微生物肥料及其生产方法
[57]摘要
本发明公开了一种复合微生物肥料及其生产方法，肥料特征：含有巴氏梭菌、浸麻芽孢杆菌、解磷巨大芽孢杆菌和胶冻样芽孢杆菌硅酸盐亚种四种微生物，其发酵物比例为40～60∶25～35∶10～20∶2～8。方法特征：将特选的巴氏梭菌、浸麻芽孢杆菌、解磷巨大芽孢杆菌和胶冻样芽孢杆菌硅酸盐亚种分别进行培养、发酵，然后将发酵产物按比例组合为复合微生物肥料。本发明可补充现有化肥和微生物肥料单一性之不足，适合于我国不同类型土壤中的作物生长，并能明显改良土质。可降低种植成本，并使粮食和蔬菜产量提高。每次使用量仅为
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50～100克/亩(666.67m)。
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权 利 要 求 书
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1、一种复合微生物肥料，其特征是：含有巴氏梭菌、浸麻芽孢杆菌、解磷巨大芽孢杆菌和胶冻样芽孢杆菌硅酸盐亚种四种微生物，其发酵物比例为40～60∶25～35∶10～20∶2～8。
2、根据权利要求1所述的复合微生物肥料，其特征是：巴氏梭菌、浸麻芽孢杆菌、解磷巨大芽孢杆菌和胶冻样芽孢杆菌硅酸盐亚种四种复合微生物菌群的发酵物比例为50∶30∶15∶5。
3、一种生产复合微生物肥料的方法，其特征是：将特选的固氮细菌、具有分解有机磷功能的磷细菌和可分解钾化合物的钾细菌菌株分别进行培养、发酵，然后将发酵产物按比例组合为复合微生物肥料。 4、根据权利要求3所述的生产复合微生物肥料的方法，其特征是：特选的固氮细菌为巴氏梭菌和浸麻芽孢杆菌；磷细菌为解磷巨大芽孢杆菌；钾细菌为为胶冻样芽孢杆菌硅酸盐亚种。
5、根据权利要求3或4所述的生产复合微生物肥料的方法，其特征是：复合微生物菌群的组合比例是经正交实验确定的，四种菌发酵产物之比为：巴氏梭菌、浸麻芽孢杆菌、解磷巨大芽孢杆菌和胶冻样芽孢杆菌硅酸盐亚种＝50∶30∶15∶5。
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说 明 书
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复合微生物肥料及其生产方法
技术领域：
本发明涉及农业技术中的肥料，是一种生物肥料，具体地说，是一种新型的复合微生物肥料及其生产方法。 背景技术：
现有的微生物肥料大多是单一性的微生物肥料。如：固氮菌肥，主要由具有固氮作用的细菌和真菌组成；又如：磷细菌，其功能是分解土壤中的有机磷，使之变为易于被植物吸收的磷素；再如：钾细菌，其功能是分解土壤中的钾化合物，使之成为能被植物吸收利用的速效钾。这些肥料在单独使用时均能发挥各自作用，部分满足植物对氮，磷，钾三要素的需要。它们不会产生长期使用化肥所造成的土壤板结现象。但其不足在于：单独使用上述三类微生物肥料只能解决植物所需营养的一个方面，且成本较高，用量大，一般为3～15公斤/亩(666.67m)；同时，将三者配合使用，又因难于做到比例适当而造成施肥量的不足或浪费。长期使用单一的或复合的微生物肥料的实践证明，它们只能替代化肥的30％以下。 发明内容：
本发明的发明目的是提供一种能针对我国土壤肥力的基本情况，特别是其中氮、磷、钾三要素的基本含量状况，设计出含有固氮菌、磷细菌和钾细菌的复合性微生物肥料，以满足植物对氮、磷、钾的全面需要的复合微生物肥料及其生产方法。 本发明的技术解决方案是：
一种复合微生物肥料，其特征是：含有巴氏梭菌、浸麻芽孢杆菌、解磷巨大芽孢杆菌和胶冻样芽孢杆菌硅酸盐亚种四种微生物，其发酵物比例为40～60∶25～35∶10～20∶2～8。
本发明中所述的巴氏梭菌、浸麻芽孢杆菌、解磷巨大芽孢杆菌和胶冻样芽孢杆菌硅酸盐亚种四种复合微生物菌群的发酵物比例为50∶30∶15∶5。
一种生产复合微生物肥料的方法，其特征是：将特选的固氮细菌、具有分解有机磷功能的磷细菌和可分解钾化合物的钾细菌菌株分别进行培养、发酵，然后将发酵产物按比例组合为复合微生物肥料。
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本发明中所述的特选的固氮细菌为巴氏梭菌和浸麻芽孢杆菌；磷细菌为解磷巨大芽孢杆菌；钾细菌为为胶冻样芽孢杆菌硅酸盐亚种。复合微生物菌群的组合比例是经正交实验确定的，四种菌发酵产物之比为：巴氏梭菌、浸麻芽孢杆菌、解磷巨大芽孢杆菌和胶冻样芽孢杆菌硅酸盐亚种＝50∶30∶15∶5。
本发明的有益效果为：解决了目前国内氮肥(化肥)资源不足和价格昂贵的问题。降低肥料成本，以利于农业生产的发展。其产品中水份≤10％。细菌总数≥86亿/克；霉菌总数≤3.4亿/克。本品由两种固氮菌和磷细菌、钾细菌按正交实验确定的比例组合而成，故可补充现有化肥和微生物肥料单一性之不足，它适合于我国不同类型土壤中的作物生长。本品替代50％以上的氮、磷、钾化肥使用，可降低种植成本，提高产量。实验表明，使用本品可提高粮食产量5～30％，提高蔬菜产量10～40％，还可改善蔬菜、粮食的品质和风味。每亩(666.67m)土地使用本发明的肥料的量为50～100克，是目前国内外使用量较少的复合微生物肥料之一。
以下结合实施例对本发明作进一步的说明： 具体实施方式： 实施例一： 一、菌种
1、巴氏梭菌(Clostridium pasteurianum)
梭菌属(Clostridium)中的一个种，为可运动的无荚膜细菌。次极端形成一个卵圆形芽孢。分解糖和蛋白质，有固氧作用。不还原盐。不产生硫化氢。
2、浸麻芽孢杆菌(Bacillus macerans)
芽孢杆菌属(Bacillus)中的一个种。运动，兼性厌氧。通常从葡萄糖、阿拉伯糖和甘露醇产酸产气。VP阴性，不水解酪蛋白，可从淀粉和糖原产生环状糊精。
3、解磷巨大芽孢杆菌(Bacillus megatherium phosphaticum) 芽孢杆菌属(Bacillus)中的一个种。运动，形成荚膜，好氧。从葡萄糖产酸，也常从阿拉伯糖和甘露醇产酸。水解淀粉，不产生卵磷脂酶，VP阴性。能分解土壤中的有机磷成为植物可利用的速效磷。 4、钾细菌(胶冻样芽孢杆菌硅酸盐亚种)(Bacillus mucilaginosus
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siliceus)
在琼脂培养基上生长时，菌落呈胶冻样。能利用硅酸盐及磷石灰等磷钾矿物，并有一定固氧能力。 二、菌种培养 1、巴氏梭菌 (1)试管培养基(％)
葡萄糖1.0，(NH4)2SO4 0.001，KHPO4 0.05，K2HPO4 0.05，MgSO4·7H2O 0.02，NaCl 0.001，FeSO4 0.001，酵母膏0.01，琼脂1.5，蛋白胨0.01，CaCO3 0.5，蒸馏水100，PH7.0。 (2)培养温度：25±2℃。 (3)液体菌种(一级菌种)
培养基同试管，只是不加琼脂。25℃下培养。容器：摇瓶(三角瓶)。
(4)液体菌种扩大培养(二级菌种) 培养基同液体菌种，用好氧种子罐培养。 (5)固体培养
培养基：麸皮80％，豆粕粉18％，大米粉2％。液体菌种培养基占固体干重的50％。0.14MPa下灭菌1小时。40℃以下接入液体菌种，接种量20-25％。
(6)干燥：真空干燥机，60℃以下干燥，要求细胞数≥200亿/g，水分≤10％。 (7)粉碎成60目。
2、浸麻芽孢杆菌(培养温度28-30℃) (1)试管培养基(％)
蛋白脂0.5，牛肉膏0.3，琼脂1.5，NaCl 0.5，蒸馏水100，PH7.0。 (2)液体一级菌种
培养基同(1)，不加琼脂，以500ml玻璃瓶培养。 (3)液体二级菌种
培养基同(2)，以兼性厌氧种子罐培养。 (4)固体培养
①培养基固体成分：麸皮70％，豆粕粉20％，玉米粉10％。 ②培养基液体成分：按液体菌种培养基成分的50％加入。
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③灭菌：0.14MPa，1小时。 ④接种量：20-25％。
其他操作同1，要求：活细胞数≥150亿/g，水分≤10％。 3、解磷巨大芽孢杆菌 操作不同于1处：
(1)试管培养：土豆汁20％，蔗糖2％，琼脂2％，蒸馏水100％。 (2)液体培养：与(1)同，不加琼脂。 (3)固体培养：同2之(4)。
(4)活细胞数≥80亿/g，水分≤10％。 4、钾细菌 与1不同处：
(1)试管培养：甘露醇1％，KH2PO4 0.02，MgSO4·7H2O 0.02，CaSO4·2H2O 0.02，NaCl 0.02，CaCO3 0.5，琼脂2.0，蒸馏水100。(培养温度25-30℃)。
(2)液体培养：同4之(1)，不加琼脂。 (3)固体培养：同1之(4)。 (4)活菌数≥25亿/g。 三、菌种比例
巴氏梭菌∶浸麻芽孢杆菌∶解磷巨大芽孢杆菌∶钾细菌＝50∶30∶15∶5。 四、用法
每亩(666.67m)使用量为50～100克。在本发明复合微生物肥料中加入100倍的自来水和5倍的尿素，在22℃以上45℃以下的水温中活化24小时，然后连同化肥(按上一年使用量的10～50％)一起洒入土壤中。最好作基肥，每年使用1～3次(短生长期作物为1次，长生长期作物为1～3次)。 五、原理
1、巴氏梭菌、浸麻芽孢杆菌有固氮作用。 2、解磷巨大芽孢杆菌有解有机磷作用。 3、钾细菌有解钾作用。
4、巴氏梭菌能分解粘胶样物，促成土壤团粒结构的形成，有抗旱作用。
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5、浸麻芽孢杆菌有抑制病菌繁殖作用。
6、用量小但又作用大的原理：有效活菌多，培养基中的有机物在土壤中能促进四种细菌的繁殖。 六、肥料的配制：
将已培养好的四种微生物按正交实验确定的比例进行混合，即巴氏梭菌、浸麻芽孢杆菌、解磷巨大芽孢杆菌和胶冻样芽孢杆菌硅酸盐亚种四种发酵物比例为50∶30∶15∶5。并搅拌均匀后，装袋，即成本发明的复合微生物肥料产品。 实施例二： 一、菌种
1、巴氏梭菌(Clostridium pasteurianum) 2、浸麻芽孢杆菌(Bacillus macerans)
3、解磷巨大芽孢杆菌(Bacillus megatherium phosphaticum) 4、钾细菌(胶冻样芽孢杆菌硅酸盐亚种)(Bacillus mucilaginosussiliceus)
四种菌种制作方法基本同前例。 二、肥料的配制：
将已培养好的四种微生物按止交实验确定的比例进行混合，即巴氏梭菌、浸麻芽孢杆菌、解磷巨大芽孢杆菌和胶冻样芽孢杆菌硅酸盐亚种四种发酵物比例为60∶25∶10∶5。并搅拌均匀后，装袋，即成本发明的复合微生物肥料产品。 三、用法
每亩(666.67m)使用量为50克。在本发明复合微生物肥料中加入80倍的自来水和4倍的尿素，在22℃以上45℃以下的水温中活化20小时，然后连同化肥(按上一年使用量的10％)一起洒入土壤中。最好作基肥，每年使用1～3次。 实施例三： 一、菌种
1、巴氏梭菌(Clostridium pasteurianum) 2、浸麻芽孢杆菌(Bacillus macerans)
3、解磷巨大芽孢杆菌(Bacillus megatherium phosphaticum) 4、钾细菌(胶冻样芽孢杆菌硅酸盐亚种)(Bacillus mucilaginosus
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siliceus)
四种菌种制作方法基本同实施例一。 一、肥料的配制：
将已培养好的三类四种微生物按正交实验确定的比例进行混合，即巴氏梭菌、浸麻芽孢杆菌、解磷巨大芽孢杆菌和胶冻样芽孢杆菌硅酸盐亚种四种发酵物比例为45∶35∶18∶2；并搅拌均匀后，装袋，即成本发明的复合微生物肥料产品。 三、用法
每亩(666.67m)使用量为100克。在本发明复合微生物肥料中加入120倍的自来水和6倍的尿素，在22℃以上45℃以下的水温中活化28小时，然后连同化肥(按上一年使用量的50％) 一起洒入上壤中。最好作基肥，每年使用1～3次。 实施例四： 一、菌种
1、巴氏梭菌(Clostridium pasteurianum) 2、浸麻芽孢杆菌(Bacillus macerans)
3、解磷巨大芽孢杆菌(Bacillus megatherium phosphaticum) 4、钾细菌(胶冻样芽孢杆菌硅酸盐亚种)(Bacillus mucilaginosussiliceus)
四种菌种制作方法基本同前例。 二、肥料的配制：
将已培养好的三类四种微生物按正交实验确定的比例进行混合，即巴氏梭菌、浸麻芽孢杆菌、解磷巨大芽孢杆菌和胶冻样芽孢杆菌硅酸盐亚种四种发酵物比例为40∶35∶20∶5；并搅拌均匀后，装袋，即成本发明的复合微生物肥料产品。 三、用法
每亩(666.67m)使用量为75克。在本发明复合微生物肥料中加入101倍的自来水和5倍的尿素，在22℃以上45℃以下的水温中活化22小时，然后连同化肥(按上一年使用量的30％)一起洒入土壤中。最好作基肥，每年使用1～3次。 实施例五： 一、菌种
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1、巴氏梭菌(Clostridium pasteurianum) 2、浸麻芽孢杆菌(Bacillus macerans)
3、解磷巨大芽孢杆菌(Bacillus megatherium phosphaticum) 4、钾细菌(胶冻样芽孢杆菌硅酸盐亚种)(Bacillus mucilaginosussiliceus)
四种菌种制作方法基本同前例。 二、肥料的配制：
将已培养好的三类四种微生物按正交实验确定的比例进行混合，即巴氏梭菌、浸麻芽孢杆菌、解磷巨大芽孢杆菌和胶冻样芽孢杆菌硅酸盐亚种四种发酵物比例为50∶30∶12∶8；并搅拌均匀后，装袋，即成本发明的复合微生物肥料产品。 三、用法
每亩(666.67m)使用量为60克。在本发明复合微生物肥料中加入90倍的自来水和5.5倍的尿素，在22℃以上45℃以下的水温中活化26小时，然后连同化肥(按上一年使用量的40％)一起洒入土壤中。最好作基肥，每年使用1～3次。
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