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邻二氮菲分光光度法测定微量铁
一、实验目的
1. 学习确定实验条件的方法，
2. 掌握邻二氮菲分光光度法测定微量铁的方法原理；
3. 掌握721型分光光度计的使用方法，并了解此仪器的主要构造。
二、实验原理
1. 本试验测定铁含量的原理：根据朗伯－比耳定律：A=εbc。
当入射光波长λ及光程b一定时，在一定浓度范围内，有色物质的吸光度A与 该物质的浓度c成正比。只要绘出以吸光度A为纵坐标，浓度c为横坐标的标 准曲线，测出试液的吸光度，就可以由标准曲线查得对应的浓度值，测出铁的含量。
2.邻二氮菲法简介： 邻二氮菲为显色剂，选择测定微量铁的适宜条件和测 量条件，并用于水中铁的测定。在pH=2～9的范围内，邻二氮菲与二价铁生成稳定的桔红色配合物（（Fe(phen)3）2+）。
测定时控制溶液的酸度为pH≈5较为适宜，用邻二氮菲可测定试样中铁的总量。 三、仪器试剂
1. 仪器：721型分光光度计；1cm吸收池；10mL 吸量管；50mL 容量瓶(7个)。
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2. 试剂：20μg·mL-1铁标准溶液；0.1%邻二氮菲水溶液；10%盐酸羟胺溶液；
1mol·L-1乙酸钠溶液；1 mol·L-1NaOH溶液。
四、实验步骤 1.吸收曲线的绘制
容量瓶（50mL） 20ug/mL铁标准5mL， 1.00mL 10%盐酸羟胺 摇匀， 3.00 mL 0.15%邻二氮菲溶液 5.0 mLNaAc溶液 定容
以水参比在440～560 nm间，每隔10 nm测量一次吸光度
以波长为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸收曲线，选择测量的适宜波长。 2.标准曲线的制作
在6支50mL比色管中，分别加入0.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0mL 20μg/mL 铁标准溶液，再加入1.00mL 10%盐酸羟胺溶液，经2min后，再各加入3.0mL 0.1% 邻二氮菲溶液和5.0 mL NaAc溶液，以水稀释至刻度，摇匀。在510nm处，以试剂 空白为参比，测吸光度A。
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3．未知液中铁含量测定
吸取5mL未知液代替标准液，其他步骤同上。测定并记录吸光度。由绘制的标 准曲线查出Fe2+离子浓度。 五、实验数据记录与处理 1.吸收曲线的绘制
波长（nm） 570 550 530 520 510
根据上面数据，作得标准曲线图如下：
吸光度A 0.048 0.133 0.349 0.422 0.446 波长（nm） 500 490 470 450 430 吸光度A 0.430 0.415 0.388 0.327 0.278
由作图可知，最大吸收波长为510nm。
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2. 标准曲线的制作
试液编号 1 2 3 4 5 6 标准溶液的量/ mL 标准溶液浓度/(ug/mL) 总含铁量/ 0 2.0 4.0 6.0 8.0 10.0 0 0.8 1.6 2.4 3.2 4.0 0 40 80 120 160 200 吸光度A 0 0.203 0.404 0.609 0.808 1.011 根据以上数据绘制出Fe2+离子浓度吸光度曲线图，如下
3. 未知液中铁含量测定
测得未知液 A=0.416 由表得 C(Fe2+) =1. μg/mL 。 所以，未知液浓度 C未知液 = C(Fe2+)*50/5 =16.4 μg/mL。
小结：通过实验数据可知，最适宜波长为λ=510nm；最终由标准曲线得未知液铁的含量为：16.4 μg/mL。
六、实验误差分析
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实验中误差来源主要有
1) 移取标准溶液时产生误差 2) 测定时引入的误差 3) 仪器带来的误差 4) 绘制曲线带来的误差 5).'
溶液中其他离子的干扰
