万方数据・884・冲澡材JuooalofChineseMedicinalManetals第30卷第7期2007年,月我国海马的研究进展 姜素芬‘,吉爱国’2,,梁浩2,宋淑亮2,王伟莉’(1.山东大学威海分校海洋学院,山东威海264209;2.山东大学威海国际生物技术研发中心,山东威海264209)摘要 通过查阅国内外资料并进行分析和综述,对海龙科海马属动物的化学成分和药理活性研究状况进行了概述。 关键词海马;生物学;化学成分;药理活性中图分类号: 2R84.1文献标识码:A文章编号:1014巧4(2D07)70一884拱 海马是海龙科动物,性温、味甘,是传统补益中起的混乱。药,具有温肾壮阳、散结消肿的作用。中国药典吴平等〔 5〕应用古DNA技术从5种海马药材提2005年版规定其入药为海龙科动物线纹海马(万动-取DNA,PCR扩增1s2rRNA基因片段和细胞色素b尸oca呷uskellOggijordanetsnyder)、刺海马(刀诃,0-基因部分片段后,对扩增产物进行了RFLP分析和ca呷ushistrxiKaup)、大海马(刀勿poca呷。kudaDNA序列分析。结果表明,RFLP分析可鉴别2种lBeker)、三斑海马(刀柳。caPmustril刀acluta。海马,DNA序列分析得到的分子遗传标记可鉴别5eLac)h和小海马(海蛆)(刀妙ocampojPaonic哪种海马。张朝晖等困首次对大海马、三斑海马和小aKuP)的干燥体〔‘〕。海马药用历史悠久,早在梁代海马的皮膜进行了扫描电镜观察与图像定量分析。陶弘景《本草经集注》中已有记载,时称“水马”。公董婷霞等〔’〕用高效毛细管电泳(HPcE)法对不同来元739年陈藏器在《本草拾遗》中首次使用海马之源的海马进行了鉴别分析,建立了其特征谱。王树名。欧洲从18世纪开始将海马人药。《本草纲目》春等〔‘〕采用粉末x射线衍射Fouirer图谱鉴定法,得记载:“海马,主难产及血气痛;暖水脏,壮阳道;消到了线纹海马、刺海马的对照X射线衍射Foureir图瘾块,治疗疮肿毒”〔2〕。故有温肾壮阳,散结消肿之谱和特征标记峰值。功效;主治阳痪、肾虚作喘、症痕积聚、凛病痰核、跌还有利用线粒体DNA多态性研究印太地区6 打损伤,外治痈肿疗疮。近年来的药理研究表明海个区域的刀称孕ocampusk以Za海马群落的系统发生马不仅有激素样作用,增强造血功能,还显示了抗学,以鉴定其是否来源于相同的祖先〔9〕。癌、抗衰老、抗疲劳和CaZ十阻断等作用。通过对万勿户o ca呷uskuda,且trimaculat。的肌1海马的生物学性质肉蛋白进行非变性聚丙烯酞胺凝胶电泳发现二者各,.,海马的分类海马属脊索动物门硬骨鱼钢具有两种特异性蛋白〔‘。〕,其分子量分别是66.8、(Steichthyes)、海龙目(Syngnathiofmres)、海龙科39.skDa和674.3、50.skDa,在各自蛋白含量中的(Syngnathidae)、海马属口句孕oca呷。R‘nseque)。比例分别是69.8%、16.2%和46.0%、7.5%,这为本属种类繁多,分类也较困难,现已知全世界有近海马分类学提供了新的重要信息。03种,产于中国沿海的现已知7种〔’〕。1,2海马的生物习性及其资源分布海马通常栖 我国常见的沿海海马有:冠海马(H.coorantsu息在水温12℃一32℃、盐度7%。一33输、溶解氧3.0介mmincke:Schleles)、刺海马(H.k众txirKa叩)、短。酬L以上、水质澄清、石砾底质、海藻丛生的沿海海刺海马(H.erinace。)、管海马(H.kudaBleeker)、域。雄海马在腹部有一个几乎完全封闭的育儿袋,日本海马(H.脚onicsuKaup)、三斑海马(H.trimac-布满血管,形成胎盘样的上皮组织,该组织由富含线ulatsuLeach)、线纹海马(H.kelloggijodranetsny-粒体的细胞构成。雄海马在孵化早期合成和分泌一der)。种新型凝集素到育儿袋中,以提高幼儿的免疫能 5种药用海马基本上保持了原鱼类的形态特力〔‘’一”〕。通过构建和分析雄海马万1即。acPmusksdu征,根据其外观特征较易区别,但线纹海马和大海马Bleekr的cDNA文库,发现其随机克隆基因片断有形态接近,易混淆。故《中国鱼类系统检索》将大海10%与已发现的免疫系统相关基因类似,使人们可马的学名定为H.keuoggijodrnaetsnyedr,而将H.以在分子水平上揭示海马的免疫和生理机制〔‘4〕。kndoBleek:称为管海马,这样可以避免因名称而引张朝晖等〔 ‘,〕先后对海南、广东、福建、江苏、山中系材JoumalofChineseMedicianlMaerti滋5第30卷第7期2007年7月・885・东、辽宁等省进行了药源调查,发现线纹海马、刺海马、大海马、斑海马主要分布于我国南海沿海;东海南部沿海主要有大海马、斑海马分布;黄勃海沿海主要有小海马分布。2海马的化学成分结果表明:两提取物均含有大量的Na、K,较多的Ca、Mg和少量的zn、Cu、pb、Cr,但EEH中zn、Cu、Ca明显低于WEH而不含Fe、Mn。2.5磷脂类许益民等〔‘9〕采用铝蓝比色法测定5种海马总磷脂含量大约在3.28一7.82m岁9。以薄2.1苗体类黄平等〔‘6〕从三斑海马得到胆街醇、层扫描和吸光度比例系数校正法分析了各样品所含胆街二醇等。王强等〔‘7〕从刺海马脂溶性部分也获得了3个街体化合物,即胆街一5一烯一3p,7。一二醇、胆街醇和胆街醇硬脂酸醋,还有一种物质2一轻基4一甲氧基一苯乙酮为首次从动物类药材中分得。张朝晖等〔‘8〕用薄层层析法对5种海马药材进行了脂溶性部分的定性分析,发现其种间差异并不明显;通过对斑海马去皮膜前后脂溶性成分的薄层色谱比较,发现皮膜中街醇类成分含量较高。2.2脂肪酸类及醋类许益民等〔‘9〕用Gc一Ms联用测定5种海马的Folhc试剂提取液的脂肪酸组成和分布,结果发现14脂肪酸中,主要以十六酸、9一十八碳烯酸、8,11一十八碳二烯酸和4,7,10,13,16,19-二十二碳六烯酸(DHA)为主。不饱和脂肪酸占总脂肪酸比较的65.15%一76.22%。张强等〔,0〕采用J决速脂肪提取法提取了尖海龙和日本海马的脂肪酸,发现在饱和脂肪酸中,均以C,6:。为主,除C12:。、C18:。以外,其他均为微量;在不饱和脂肪酸中,它们分别都含有C16::,C:7:,,C18:2,C18:3和CZD:4异构体,测得日本海马脂肪中E以+DHA占14.1%。2.3氨基酸类张朝晖〔‘幻采用微量凯氏定氮法测定海马总氮量,有5种海马的蛋白质含量为76.90%一73.56%。每1009样品中水解氨基酸总量达59.56一65.829,其中7种必需氨基酸占总氨基酸含量的30%。陈维宁等〔川利用高效液相色谱法对海马水提物(WEH)和乙醇提取物(EEH)中17种氨基酸含量进行分析测定,发现含有丰富的人体必需氨基酸,但两提取物中所含氨基酸的种类和数量有较大差异。WEH中含有所测17种氨基酸,EEH中只有10种,WEH含有所测6种必需氨基酸(场5,Phe,Leu,Ile,Met,Val),EEH中有4种(场5,Phe,Leu,Ile),氨基酸总含量WEH为18.53/gL,EEH为0.74留L。2.4微量元素张朝晖〔‘创利用电感藕合等离子体发射光谱法测出海马体内有20种微量元素存在,其中锰、锌含量相对较高,这与其补肾壮阳作用相吻合,并且铁含量相对较高,这也许与该类药材常与其他药物配伍用于滋肝补肾、补血生精的功效有一定的联系。陈维宁等卿〕用火焰原子吸收法对海马WEH和EEH中两提取物中10种微量元素的测定万方数据磷脂组分的种类及摩尔百分比,根据显色结果及参照磷脂标准品,海马含5种磷脂组分,以磷醋酞胆碱、溶血磷脂酞胆碱和神经鞘磷脂为主。3药理研究3.1激素样作用佘敏等〔)2应用放射免疫法测定小鼠翠酮含量,证实大海马具有雄性激素样作用。克氏海马(刀心孕oca呷uskelloggijodrnaetsnyder)乙醇提取物能显著增加正常雄性小鼠的精子数和精子活率,但对正常小鼠的性器官和附性器官几无影响;还可以对抗环磷酞胺引起的小鼠的精子数降低、精子活率下降的作用及性器官、附性器官的重量降低〔”〕。口服日本海马能明显提高氢化可的松所致阳虚 小鼠的抗疲劳能力,提高小鼠碳粒廓清速率,增加幼鼠前列腺、精囊、肇丸的重量,并且能提高小鼠血清罕酮的含量及翠丸组织中。AMP水平〔川。许东晖等〔川研究了沁阳春海马胶囊的壮阳药理作用,结果表明:灌胃给药20天,与空白对照组相比,海马胶囊低、中、高剂量(0.405、0.135、0.405岁k岁d)能明显增加去势大鼠包皮腺、前列腺的重量;高剂量组能明显缩短去势大鼠阴茎受电刺激勃起潜伏期。许东晖等〔川研究发现野生三斑海马和人工养殖大海马有明显治疗实验性前列腺增生的作用,同时克服阳性药非那雄胺造成的阳疾、性欲低下、精子数目减少的副作用。3.2抗衰老作用大海马能增加小鼠的耐缺氧性,减少单胺氧化酶(MAO一B)活性,降低过氧化脂质在体内的水平,同时还证实大海马具有抗应激、抗氧自由基、降血脂、增强学习记忆能力、调节免疫功能、促进血液流变学改变和改善微循环等作用,显示出抗衰老活性〔川。5种海马提取物对L一谷氨酸致大鼠神经元钙内流有明显抑制作用〔”1,其中大海马提取物的抑制作用最强,日本海马提取物的抑制作用最弱。须知,钙离子进入神经元在兴奋性氨基酸L一谷氨酸致神经元溃变和坏死过程中起重要作用。斑海马甲醇提取物能明显抑制大鼠实验性颈动 脉血栓和脑血栓的形成〔川,其有效成分为4种长链不饱和脂肪酸。其中以9,12一十八碳二烯酸含量最高.为18.5%。冯星等〔洲观察中药海马提取物对实・886‘冲澡材JuomalofChineseMedicinalMateirlas第30卷第7期2以)7年7月验性脑缺血再灌损伤的药理作用,得出海马提取物具有保护大鼠FR(局灶性脑缺血/再灌注)后受损1039.[3]1城Wrence,C.Breedingsehoasres一Factsandfllacaies.万方数据脑组织的作用。3.3抗疲劳作用三斑海马能延长小鼠负重游泳时间,有效降低游泳后血乳酸含量,能够提高机体运动能力,延缓疲劳发生和加速疲劳恢复,抗疲劳作用比人参效果好〔’。〕。彭汉铎等〔’‘〕研究发现海马乙醇提取物对于正常小鼠可延长其在缺氧、寒冷以及缺氧合并寒冷条件下的生存时间,延长游泳时间,其作用有明显的量效关系。3,4抗肿瘤作用海马乙醇提取物能明显增强小鼠巨噬细胞吞噬能力,抑制迟发性超敏反应〔’2〕,具有一定的免疫调节作用。海马乙醇提取物能抑制乳腺癌和腹腔肿瘤〔3,〕。李琪文等〔’4〕观察了线纹海马对小鼠518。实体瘤的抑制作用,得出海马具有抗肿瘤作用,且与其促进免疫功能有关。海马生髓丸具有一定的抗肿瘤作用〔划,可以抑制sLS。荷瘤鼠的肿瘤生长,明显增强SKOV3卵巢癌模型鼠DDP的杀伤肿瘤作用,对肿瘤细胞的凋亡具有明显促进作用。3.5增强学习记忆功能于廷曦等饰〕从斑海马(万心少oca呷us沉macula‘。玩ac)h中分离出1种肤类抑制剂,可以拮抗谷氨酸单钠引起的降低ro日龄仔鼠惊厥闽、降低60d龄仔鼠Y一迷宫一学习记忆能力、仔鼠不能抓牢绳、或者能抓绳但不能在绳上爬行等作用。我国海马生物资源分布广泛, 活性成分丰富,由于海马其活性物质及制成品具有广泛的药理作用,例如温肾壮阳、缓解前列腺增生、耐缺氧、抗氧化、抗疲劳、延缓衰老、抗肿瘤等,所以是珍贵的海洋生物药用资源,具有重要的研究及开发利用价值,随着海马养殖技术的发展,其市场前景十分可观。目前已经研制出了各种海马酒、海马胶囊、养生液等系列保健品;制成了各种海马中成药;关于海马的技术专利也有很多。对海马化学成分的研究主要集中在微量元素、 氨基酸、磷脂和街体类等,忽略了对水溶性组分中多肤、多糖和蛋白质的研究,近来人们对各种活性多肤和酸性粘多糖的研究发现,它们往往具有很强的药理活性,有待有关专家学者对海马水溶性组分再进一步进行相关的实验,使人们对于海马的认识更加完整。参 考文献〔1」国家药典委员会.中华人民共和国药典.一部,北京: 人民卫生出版社,2005:206.〔2」李时珍.本草纲目.北京:中国中医药出版社,1989:Westenrfisheires,1998:39.rse4飞,』J孟庆闻,苏锅样,缪学祖.鱼类分类学.北京:中国农业出版社,1995:529一30尸1.1、飞!L ̄吴平,周开亚,张朝晖,等.海马类药材的分子遗传标记鉴定研究.药学学报,1995,33(3):226233.厂J,.I‘U.L.J张朝晖,蹼祖茂,徐路珊,等.海马皮膜的扫描电镜观察与图像定量分析.药学学报,1998,23(12):951一54.Lsese73L董婷霞,卢振强,詹华强.海马类药材的高效毛细管电泳鉴别.中药材,201,24(5):325一329,仁5]王树春,汪兴军,翁小春,等.中药材海马的X射线衍射Four ier图谱鉴定.西北药学杂志,2《x风,19(6):245-250. 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