实验方案
一、 实验题目
克林霉素对鱼类的急性毒性试验
二、 实验背景
克林霉素属于林可酰胺类抗生素，通常用于治疗厌氧细菌的感染，亦可治疗原生动物疾病，并可有效治疗抗药性金黄色葡萄球菌的感染。随着抗生素类药物的产生及大量使用，克林霉素已在临床上普遍使用，适于治疗革兰氏阳性菌引起的各种感染性疾病如扁桃体炎、急性支气管炎、慢性支气管炎急性发作、肺炎、皮肤和软组织感染、泌尿系统感染腹膜炎和口腔感染等以及厌氧菌引起的各种感染性疾病。其成分可随生产加工过程的流失、医疗残留、病患排泄等途径进入环境，如水体，对鱼类的生长繁殖甚至生存造成一定的危害。 三、 实验目的及意义
1. 了解克林霉素对鱼类危害的程度
2. 明确克林霉素对鱼类的最大安全浓度及最小致死浓度 3. 为水产养殖业安全防护措施提供依据 四、 实验材料
克林霉素、鱼苗（金鱼）、鱼缸、鱼饲料、pH计、温度计、溶解氧测定仪、分析天平、烧杯、玻璃棒等 五、 实验原理
鱼类对水环境的变化十分灵敏，运用毒理实验方法，观察鱼类在含有化学污染物的水环境中的反应，可以比较不同化学物质的毒性高
低。鱼类毒性实验方法可分为静态方法和动态方法两大类。静态实验方法操作简单，不需要特殊设备，适宜于受试化学物在水中相对稳定，在实验过程中耗氧量较低的短期实验。动态实验方法要求具备一定的设备，对于在水中不稳定、耗氧量较高的化学物需要进行较长时间的实验观察时，可采用动态实验方法。本实验使用静态实验方法。 六、实验方法
将年龄、体长相当的斑马鱼放入一定浓度梯度的克林霉素溶液中，同时设置对照组及平行样，连续观察8小时，看鱼在改环境下的反应，并记录期24、48、96小时的死亡个体，利用对数直线内插法计算其半致死浓度TLm，以及安全浓度SC。 七、实验步骤
1. 实验用水
用于驯养和配置实验液的水，可用自来水太阳下放置3d以上脱氯
2.试验鱼驯养
在与实验相当的环境条件下驯养至少7天，每天换水，每天喂食1-2次，在试验前一天应停止喂食，以免剩余饵料及粪便影响水质。
2. 预实验
选择较大范围的浓度系列，如1000mg/l、100mg/l、10mg/l、1mg/l、0.1mg/l，每个浓度放入5条鱼，不设平行组，持续48~96h,每天至少两次记录死鱼数，并及时取出死鱼，求出24h100%死亡浓度和96h无死亡浓度。若无法确定正式实验浓度范围，应另选一浓度范围进行
预实验。
4. 正式实验
根据预实验得出的结果，在包括使鱼全部死亡的最低浓度和96h鱼类全部存活的最高浓度之间至少设置5个浓度组，并以几何级数排布，每个试验浓度组设2个平行，每一系列设一个空白对照，每组放入试验鱼10尾。连续观察8h，记录试验鱼的异常行为，如鱼体侧翻、失去平衡、游泳能力和呼吸作用减弱、色素沉积等，并记录24h、48h、96h的死亡数目（以鳃的扇动、碰触尾柄后无反应为死亡标准），试验过程中及时清理排泄物和死亡个体。
在试验开始和结束时测定pH、温度和溶解氧。 5. 数据处理
以暴露浓度为横坐标，死亡率为纵坐标，在对数概率纸上，绘制暴露浓度对死亡率的曲线，用直线内插法计算出24h、48h、96h的半致死浓度（LC50），以及安全浓度SC=TLm48/(TLm24/TLm48)2 化学物质极性毒性分级
96hLC50(mg/l) <1 毒性分级 极高毒 1~10 高毒 10~100 中毒 >100 低毒
