中国病理生理杂志Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐａｔｈｏｐｈｙｓｉｏｌｏ ！丝（ Ｑ ２；！ 二 ・ｌ９８９・ ［文章编号］１０００—４７１８（２００８）ｌ０—１９８９—０４ 急性应激对成年鼠血浆肾素活性、Ａｎｇ １Ｉ水平 和海马细胞骨架的影响 孙国刚 ， 欧册华 ， 陈 波 ， 陈 跃 ， 范光碧 （泸州医学院’解剖学教研室， 附属医院麻醉科， 附属医院核医学科，￣ｔ）ｌｌ泸州６４６０００） ［摘要］ 目的：观察急性应激对雌、雄成鼠血浆肾素活性（ＰＲＡ）、血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇＵ）水平的影响和应激 鼠背侧海乌细胞骨架的改变。方法：按雌、雄性分组，将ｓＤ成鼠束缚并倒悬应激６ ｈ／ｄ，３ ｄ后通过放射免疫法测 定ＰＲＡ、ＡｎｇＩＩ水平，用免疫组织化学方法观察海马巢蛋白（ｎｅｓｔｉｎ）、神经丝蛋白２００（ＮＦ２００）表达的变化。结果： ①雌、雄性应激大鼠血浆ＰＲＡ水平均比正常对照组显著下降（Ｐ＜０．０１），而且雌、雄动物血浆ＰＲＡ／ＡｎｇｌＩＩ；Ｌ值下降幅 度接近。②应激组背侧海马齿状回、ＣＡ３区内ｎｅｓｔｉｎ、ＮＦ２００免疫阳性物总面积（ｓｕｍ ｏｆ ａｒｅａ，ＳＡ）和累积吸光度（ｉｎｔｅ— ｇｒａｌ ａｂｓｏｒｂａｎｃｅ，／Ａ）均明显低于对照组（Ｐ＜０．０１）。结论：急性应激时大鼠背侧海马内神经元的细胞骨架损害可能与 应激动物血浆ＰＲＡ水平变化存在某种联系。 ［关键词］应激；肾素；海马；巢蛋白；神经微丝蛋白质类；大鼠 ［中图分类号］ Ｒ３６３ ［文献标识码］ Ａ Ａｃｕｔｅ ｓｔｒｅｓｓ ａｆｆｅｃｔｓ ｔｈｅ ＰＲＡ ａｎｄ ＡｎｇｌＩ ｌｅｖｅｌｓ ｉｎ ｐｌａｓｍａ ａｎｄ ｔｈｅ ｃｙｔｏｓｋｅｌｅ－ ｔｏｎｓ ｉｎ ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ ｉｎ ａｄｕｌｔ ｒａｔｓ ＳＵＮ Ｇｕｏ—ｇａｎｇ ，ＯＵ Ｃｅ—ｈｕａ ，ＣＨＥＮ Ｂｏ ，ＣＨＥＮ Ｙｕｅ ，ＦＡＮ Ｇｕａｎｇ—ｂｉ （ Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆａｎａｔｏｍ）， Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆＡｒｔｅｓｔｈｅｓｉｏｌｏｇｙ，Ａｉｌｆｉａｔｅｄ ｈｏｓｐｉｔａｌ， Ｄｅｐａｒｔｅｎｔｍ ｏｆＮｕｃｌｅａｒ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ａｉｌｆｉａｔｅｄ ｈｏｓｐｉｔａｌ Ｌｕｚｈｏｕ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ．Ｌｕｚｈｏｕ ６４６０００，Ｃｈｉｎａ．Ｅ～ｍａｉｌ：５ １６５６２＠ｓｉｎａ．ｃｏｒｎ） ［ＡＢＳＴＲＡＣＴ ＡＩＭ：Ｔｏ ｏｂｓｅｒｖｅ ｔｈｅ ｃｈａｎｇｅｓ ｉｎ ｐｌａｓｍａ ｒｅｎｎｉｎ ａｃｔｉｖｉｔｙ（ＰＲＡ）ａｎｄ ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎⅡ（ＡｎｇⅡ）ｌｅｖｅｌ ａｎｄ ｔｈｅ ｃｙｔｏｓｋｅｌｅｔｏｎｓ ｉｎ ｄｏｒｓａｌ ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ（ＤＨ）ｉｎ ｍａｌｅ ａｎｄ ｆｅｍａｌｅ ｓｔｒｅｓｓｅｄ ｒａｔｓ．ＭＥＴＨＯＤＳ：Ｔｈｅ ａｄｕｌｔ Ｓｐｒａｇｕｅ— Ｄａｗｌｅｙ ｍａｌｅ ａｎｄ ｆｅｍａｌ ｒａｔｓ ｗｅｒｅ ｓｔｒｅｓｓｅｄ ｆｏｒ ６ ｈ ｐｅｒ ｄａｙ．Ｔｈｒｅｅ ｄａｙｓ ｌａｔｅｒ，ｔｈｅ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ＰＲＡ ａｎｄ Ａｎｇ ｌＩ ｉｎ ｐｌａｓｍａ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｂｙ ｒａｄｉｏｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ，ａｎｄ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｎｅｓｔｉｎ ａｎｄ ＮＦ２００ ｉｎ ｄｅｎｔａｔｅ ｇｙｍｓ（ＤＧ）ａｎｄ ＣＡ３ ｒｅｇｉｏｎｓ ｗｅｒｅ ｏｂｓｅｒｖｅｄ ｗｉｔｈ ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｓｔａｉｎｉｎｇ．ＲＥＳＵＬＴＳ：①Ｔｈｅ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ＰＲＡ ｉｎ ｐｌａｓｍａ ｏｆ ｍａｌｅ ｏｒ ｆｅｍａｌｅ ｒａｔｓ ｗｅｒｅ ｄｅ— ｃｒｅａｓｅｄ ｉｎ ｓｔｒｅｓｓｅｄ ｒａｔｓ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐｓ（Ｐ＜０．０１ １．Ｔｈｅ ｌｅｖｅｌ ｏｆ Ａｎｇ ＩＩ ｉｎ ｐｌａｓｍａ ｗａｓ ｒｅｄｕｃｅｄ ｉｎ ｓｔｒｅｓｓｅｄ ｆｅ— ｍａｌｅ ｒａｔｓ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｃｏｎｔｒｏｌ ｆｅｍａｌｅ ｒａｔｓ，ｂｕｔ ｔｈｅｒｅ ｗａｓ ａ ｓｉｍｉｌａｒ ｄｅｃｒｅａｓｅ ｏｆ ｔｈｅ ｒａｔｉｏ ｃｈａｎｇｅ ｏｆ ＰＲＡ／Ａｎｇ Ｕ ｉｎ ｐｌａｓｍａ ｂｅｔｗｅｅｎ ｔｈｅ ｍａｌｅ ａｎｄ ｆｅｍａｌｅ ｓｔｒｅｓｓｅｄ ｇｒｏｕｐｓ．￣）Ｔｈｅ ｓｕｍ ｏｆ ａｒｅａ（ＳＡ）ａｎｄ ｉｎｔｅｇｒａｌ ａｂｓｏｒｂａｎｃｅ（／，４）ｏｆ ｎｅｓｔｉｎ／ＮＦ２００一 ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｉｎｎｅｒ ｂｌａｄｅ（ＩＢＬ）ｏｆ ＤＧ ａｎｄ ＣＡ３ ｒｅｇｉｏｎ ｏｆ ＤＨ ｗｅｒｅ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ｓｔｒｅｓｓｅｄ ｍａｌｅ ａｎｄ ｆｅｍａｌｅ ｒａｔｓ ｅｏｎｌ— ｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐｓ（Ｐ＜０．０１）．ＣＯＮＣＬＵＳＩＯＮ：Ｔｈｅｓｅ ｄａｔａ ｓｕｇｇｅｓｔｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｉｎｊｕｒｙ ｏｆ ｃｙｔｏｓｋｅｌｅｔｏｎｓ ｉｎ ｎｅｕｒｏｎｓ ａｎｄ ｎｅｕｒｏｎａｌ ｐｒｅｃｕｒｓｏｒｓ ｉｎ ＤＨ ｍｉｇｈｔ ｂｅ ｒｅｌａｔｅｄ ｔｏ ｔｈｅ ｄｅｃｒｅａｓｅ ｉｎ ＰＲＡ ｏｆ ｐｌａｓｍａ ｉｎ ａｃｕｔｅ ｓｔｒｅｓｓｅｄ ｒａｔｓ． ［ＫＥＹ ＷＯＲＤＳ』 Ｓｔｒｅｓｓ；Ｒｅｎｉｎ；Ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ；Ｎｅｓｔｉｎ；Ｎｅｕｒｏｆｉｌａｍｅｎｔ ｐｒｏｔｅｉｎｓ；Ｒａｔｓ 应激能导致人和动物的生理、心理以及行为发 固酮系统的应激性变化时，很少考虑到实验动物的 生改变，海马是应激时中枢神经系统损伤的主要部 性别因素。为了明确应激早期血浆肾素一血管紧张 位 。目前，应激所引起的学习记忆相关脑区的 素变化是否与动物性别有关，同时观察应激早期动 细胞骨架可塑性改变，是重要的热点领域 。 。但 物海马神经细胞的细胞骨架可塑性变化，本研究通 是，各种应激造模方法对实验动物海马结构和功能 过放射免疫分析和免疫组织化学相结合的方法，观 影响的报道差异较大，甚至截然相反 卜“ ；而且，现 察了急性恶性刺激对成年Ｓｐｒａｇｕｅ—Ｄａｗｌｅｙ（ＳＤ）大 有文献在分析应激动物血浆肾素一血管紧张素一醛 鼠血浆肾素活性（ｐｌａｓｍａ ｒｅｎｎｉｎ ａｃｔｉｖｉｔｙ，ＰＲＡ）、血管 ［收稿日期］２００８—０５—２９ Ｅ—ｍａｉｌ：５１６５６２＠ｓｉｎａ．ｃｏｒｎ ［修回日期］２００８—０７—３１ ［基金项目］泸州医学院自然科学研究基金课题资助（Ｎｏ．０６０２０１０） ・１９９０・ 紧张素Ⅱ（ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ ｌＩ，Ａｎｇ １１）水平和海马内巢蛋 前的各步之间，均按常规用磷酸缓冲液（ＰＢＳ液）漂 白（ｎｅｓｔｉｎ）、神经丝蛋白２００（２００ ｋＤ ｎｅｕｒｏｆｉｌａｍｅｎｔ 洗５次，每次５ ｒａｉｎ。Ｉ抗ｎｅｓｔｉｎ为兔多克隆抗体 ｐｒｏｔｅｉｎ，ＮＦ２００）表达的影响。 （１：１５０—２００，Ｒａｂｂｉｔ，ＢＡ１２８９，Ｂｏｓｔｅｒ），ＮＦ２００为小 材料和方法 鼠单克隆抗体（１：２００，ＢＭ０１００，Ｂｏｓｔｅｒ）；ｌＩ抗为生物 素化羊抗兔和生物素化羊抗小鼠（１：２００，ＢＡＩＯ０１、 １动物分组 ＢＡ１００３，Ｂｏｓｔｅｒ）。 实验于２００６—２００７年在泸州医学院神经生物 在免疫组织化学的ＤＡＢ呈色结束、漂洗后，选 学研究室完成。大鼠由泸州医学院实验动物中心提 择部分切片用苏木精复染胞核。 供，选择清洁级３月龄正常ＳＤ大鼠１６只，雌雄各 ６图像采集 半，体重１５０—２００ ｇ，动物房温度维持在（２２±３）ｏＣ， 光镜下观察，每只大鼠选取连续的５张切片，在 相对湿度为（５０±２０）％。动物先按性别分组，然后 ４００倍下，每张切片选取齿状回内板、ＣＡ３区的同一 随机分成正常对照组和急性应激组，数量各半。 区域拍照。采用ｌｍａｇｅ—Ｐｒｏ Ｐｌｕｓ ５．０图像分析系 ２应激处理 统，对ｎｅｓｔｉｎ与ＮＦ２００免疫阳性物进行半定量检测， 大鼠在实验室内饲养１周后，将应激大鼠固定 分别测量ｎｅｓｔｉｎ、ＮＦ２００免疫阳性细胞总面积（ｓｕｍ ｏｆ 在不锈钢圆筒上，头部置筒内底部封闭的一侧，身体 ａｒｅａ，ＳＡ）和累积吸光度（ｉｎｔｅｇｒａｌ ａｂｓｏｒｂａｎｅｅ，／Ａ）。 束缚固定于不锈钢圆筒的壁上，使大鼠处于束缚、禁 ７统计学处理 饮食、避光并倒悬于１．０ ｍ高的支架上６ ｈ／ｄ，四肢 数据用均数４－标准差（ ４－ｓ）表示，用ＳＰＳＳ １３．０ 可动但不能挣脱逃跑，连续应激处理３ ｄ，非应激时 统计学软件处理，运用ｔ检验进行统计学分析。 与对照组一起正常饲养。 结 果 ３采血、取脑及组织处理 在第３ ｄ应激刺激结束后２０ ｈ（即实验第４ ｄ）， １血浆ＰＲＡ和Ａｎｇ１１的水平测定结果 将所有大鼠逐一用乙醚深度麻醉后开胸，每只大鼠 血浆ＰＲＡ、ＡｎｇｌＩ水平的测定结果见表１。从表 经右心房迅速抽取静脉血３ ｍＬ。动物抽血后，立即 １可见，正常大鼠雌、雄性之间的ＰＲＡ、Ａｎｇ Ｈ有差异 经左心室插管、生理盐水灌洗（剪开右心房），然后４ （Ｐ＜０．０１），但ＰＲＡ／Ａｎｇ ＩＩ平均比值比较接近（雌 ℃、４％多聚甲醛经主动脉灌注固定后，剥离并完整 性：雄性：１．７７：１．５８）；本研究所使用的造模方法使 取脑，经冠状面将前脑按约４ ｍｍ的厚度切片，继续 雌雄应激大鼠血浆ＰＲＡ水平与正常对照组相比均有 在４％多聚甲醛溶液中过夜，之后石蜡包埋。 显著下降（Ｐ＜０．０１）；而ａｎｇｌｌ水平与对照组相比，雄 ４血浆肾素活性、血管紧张素Ⅱ的水平测定 性略有升高（Ｐ＞０．０５）、雌性明显降低（Ｐ＜０．０１），从 采集静脉血液后，迅速注入（在冰水浴中冷却 而使雌、雄应激大鼠血浆ＰＲＡ／ＡｎｇｌＩ平均比值的下降 的）含酶抑制剂（ＥＤＴＡ）抗凝管、摇匀，冰水浴中冷却 幅度（雌性０．６３，雄性０．７１）也比较接近。 后，在４℃３ ０００ ｒ／ｍｉｎ离心５ ｍｉｎ，分离血浆，移人专 表１血浆肾素活性和Ａｎｇ ＩＩ水平的放射免疫法测定 用试管中，一７Ｏ℃冰箱保存、备用。采用放射免疫方 Ｔａｂ １ Ｔｈｅ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ＰＲＡ＆Ａｎｇ ＩＩ ｉｎ ｐｌａｓｍａ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｙ ｒａｄｉｏ－ 法测定，ＰＲＡ、Ａｎｇ ＩＩ放免分析测定盒向天津市协和 ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ（面±ｓ．ｎ：８） 医药科技有限公司购买（ＰＲＡ批号１ １８３５３Ｃ，有效期 至２００７．０２．１７：Ａｎｇ ＩＩ批号２００６１２，有效期至 ２００７．０１．３０）。 ５切片和组织染色 取有背侧海马中段的脑组织块进行连续冠状切 片，片厚５ ｐ，ｍ。 Ｐ＜Ｏ．Ｏ１郴ｍａｌｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ；△Ｐ＜Ｏ．Ｏ１ ｆｅｍａｌｅ ｏｒ ｍａｌｅ 免疫组织化学染色采取ＡＢＣ法，主要步骤：二 ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ． 甲苯脱蜡，梯度乙醇水化，复合胰酶消化（３７℃ ２背侧海马ｎｅｓｔｉｎ、ＮＦ２００的表达变化 ３０ ｍｉｎ），３％Ｈ２Ｏ２室温氧化，１０％羊血清孵育（３７ ｏＣ Ｎｅｓｔｉｎ和ＮＦ２００在正常成年ＳＤ大鼠脑内背侧 ３０ ｍｉｎ），加Ｉ抗后置４℃孵育并过夜，加Ⅱ抗孵育 齿状回各部和ＣＡ３区内均有表达，阳性细胞的胞质 （３７℃３０ ｍｉｎ），加Ⅲ抗孵育（３７ ｃ【＝３０ ｍｉｎ），ＤＡＢ避 及突起表现为着色深度不一的棕色颗粒、斑片状或 光下显色，常规脱水、透明、封片。从加酶后到脱水 粗细不等的丝状物质（图１Ａ、Ｂ、Ｅ、Ｆ）。 199l从表2看出急性应激3d后雌雄SD大鼠背侧，、能表达表2NV200的成熟神经元数量也有所减少n。海马齿状回内板的nestin、NF200阳性反应面积和累，齿状回内板化ChaIBLesl曲、NF200阳性反应物的SA和M变积光密度均明显减弱(P，<001．)提示在受到应激处nes—理后海马内神经前体细胞和成熟神经元表达tinTab2ngesofSA．nad／Aofnestin／NF200一positiveceHsin／NF200均有减少；而且一，同一部位nestin／NF200(互±sn=8)表达降低的程度是基本，致的。组织学观察发现应激组大鼠背侧海马CA3区锥体细胞层和齿状回内外板及门区颗粒细胞的、nestin、NF200阳性反应明显减弱其中以齿状回内深染阳性，细胞的数量明显减少(甚至缺失)为特征(图1CD、)‘，P<001．粥stressedgroup．FigIThetheernestin／NF200一positivesubstanceinIBLsandCA3d，regionofdorsalhippocampuonsinrats(IHC，，×400s)．A，BnadEna，FeshowCA3winnerbladethesfde(IBL)otressentateresgyruc(DG)ly．natheCA3howreighintecontrotlgroupwC；DnadGH，howIBL，hdtgionmaindgrotivelyup；petiveA，CE，Gshtestainingin，nesinithhenamatoxylin；eB，DF，HinceNF200lls，it}lc—hetivtoxylin；res．pec．TheblackandblankalTOWSinB，DF，Hshowtheneuronsdthneuralprecursorersepely图1背侧海马齿状回内板和CA3区的nestin、Nnoo免疫阳性反应讨1、论PRA这可能是机体应激反应机制的复杂性和受性激素影响的表现；而且这些变化证明了本研究所用的固，急性应激对雌雄成鼠血浆和AngⅡ水平定复合刺激造模方法能够有效地引起雌雄成年、，、的影响大鼠肾素一一血管紧张素系统发生(PRA／An。gII比值本研究采用同时束缚倒悬和禁食的复合恶性刺、致变化的)应激性改变激法(6h／d)造模这类刺激方法能使受试动物处于，2关于应激早期大鼠海马内的细胞骨架损害持续的生理和心理应激状态动物肾素间血浆激3、一旧j』，能有效地引起模型、海马的神经细胞可塑性变化可以在应激后数小时至数天内发生，血管紧张素。一醛固酮系统的稳定性平衡，、_l“。在恶性心理应激早期除了情，，性发生变化d本研究首次发现正常雌雄两组大鼠之著差异；而且恶性心理应PRA绪反应以外还常常伴有脑结构与功能损害特别是对学习记忆相关脑区的损害¨他’’PRAAngll水平有显、、”J。后雌雄大鼠血浆3d、水平均有显著下降但，巢蛋白(nestin)是，VI类中间丝蛋白作为，，一种细雌雄大鼠应激后血浆AngIbk平呈现相反的变化。胞骨架蛋白最新研究证实、nestin不但广泛表达于成趋势(雄性略升高雌性降低)，人成鼠脑内的神经前体细胞也能表达于海马内的成，、有趣的现象是不但正常雌雄PRA／AngII比值差异不大PRA／AngII比值下3d，SD大鼠血浆熟神经元、【l。”0’；、它的聚集组装和解聚能引起神经元的，而且应激。3d后雌雄大鼠形态位置伸缩性和突触等发生可塑性变化这些表达nes降程度也接近AngII本研究中应激，tin的细胞可能参与了学习记忆过程一¨只怕0。大鼠血浆PRA、水平变化虽然有性别差异NF200则是只表达于成熟神经元内的另种细胞骨架・１９９２・ 蛋白。有研究认为，从齿状回颗粒层向海马ＣＡ３区锥 中华精神科杂志，２００７，４０（２）：１１７—１１９． Ｂｒａｍｈａｍ ＣＲ．Ｃｏｎｔｒｏｌ ｏｆ ｓｙｎａｐｔｉｃ ｃｏｎｓｏｌｉｄａｔｉｏｎ ｉｎ ｔｈｅ ｄｅｎ． 体细胞层的神经前体细胞增殖、迁移和细胞间信号转 ［７］导决定着海马的学习记忆功能＿ｌ －１７］。 本研究中，正常成鼠背侧海马ＣＡ３区锥体细胞 层和齿状回颗粒层细胞均能表达ｎｅｓｔｉｎ、ＮＦ２００，提示 ｔａｔｅ ｇｙｌｕｓ：ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ，ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ，ａｎｄ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｉｍｐｌｉ－ ｃａｔｉｏｎｓ［Ｊ］．Ｐｒｏｇ Ｂｒａｉｎ Ｒｅｓ，２００７，１６３：４５３—４７１． ［８］ 柯江维，王建红，段荣．心理应激雌性大鼠海马一下 丘脑一垂体雌激素受体的变化［Ｊ］，中国病理生理杂 志，２００６，２２（１）：９８—１０１． 正常成鼠背侧海马内同时存在神经前体细胞和成熟 神经元，这与相关文献是一致的¨ 。在恶性心理 刺激３ ｄ后，模型大鼠背侧海马内神经元的功能和细 胞结构受损，导致细胞骨架蛋白ｎｅｓｔｉｎ、ＮＦ２００表达 ［９］刘能保，洪小平，李晓恒，等．慢性复合应激对学习记 忆的影响及ｃＡＭＰ／ＰＫＡ—ＣＲＥＢ信号通路的作用［Ｊ］． 解剖学报，２００６，３７（６）：６ｌ１—６１６． 同步降低，这与其它应激方式导致的海马内细胞损 害结果相似 ’ 。 ３应激时血浆ＰＲＡ水平变化与海马神经细胞损害 的可能关系 众所周知，内皮肽、神经肽和谷氨酸等均在心理 应激的早期参与了应激过程。制动应激和急、慢性 心理应激、脑出血等均能导致血中内皮素一１（ｅｎｄｏ— ｔｈｅｌｉｎ一１，ＥＴ一１）水平比正常时明显增高，在受刺激 后２４—９６ ｈ内血浆和组织中ＥＴ一１水平达到高 峰 Ｉ３ Ｊ。 ｎ等¨ 认为，当肾素的分泌受到内皮素强 抑制时，血浆肾素水平将下降；本研究应激性肾素降 低的结果证实了这个观点。另外，应激时的靶器官 损害同血浆（而不是靶组织内）的ＥＴ一１水平高度相 关 Ｊ，神经肽Ｙ和谷氨酸也参与了海马内的细胞骨 架损害过程（我们将另文报道和分析）。因此，在恶 性心理应激早期，机体神经系统过度兴奋导致肽类 物质释放与合成异常，可能是血浆肾素一血管紧张 素系统和海马神经细胞应激性损害的共同原因，其 机制有待进一步研究。 ［参考文献］ ［１］ 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ＳＭ，ｅｔ ａ１．Ｔｈｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉｌａ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｓｉｎｇｌｅ ｏｒ ｒｅｐｅａｔｅｄ ｒｅｓｔｒａｉｎｔ ｓｔｒｅｓｓ ｏｎ ｋａｉｎｉｃ ａｃｉｄ —ｉｎｄｕｃｅｄ ｎｅｕｒｏｎＭ ｄｅａｔｈ ｉｎ ｔｈｅ ｈｉｐｐｏｃａｍｐａｌ ＣＡ３ ｒｅｇｉｏｎ： ｔｈｅ ｒｏｌｅ ｏｆ ｇｌｕｃｏｃｏｒｔｉｃｏｉｄ ａｎｄ ｖａｒｉｏｕｓ ｓｉｇｎａｌ ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ ［Ｊ］．Ｊ Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ，２００７，１０３（４）：１５３０—１５４１． ［１４］李东培，汪华侨，姚志彬．脑ｎｅｓｔｉｎ—ｉｒ神经元的发现 形态、化学、投射和功能［Ｊ］．神经解剖学杂志，２００４， ２０（６）：６４１—６４３． ［１５］Ｗａｎｇ Ｓ，Ｙａｏ Ｚ，Ｗａｎｇ Ｊ，ｅｔ ａ１．Ｅｖｉｄｅｎｃｅ ｆｏｒ ａ ｄｉｓｔｉｎｃｔ ｇｒｏｕｐ ｏｆ ｎｅｓｔｉｎ—ｉｍｍｕｎｏｒｅａｃｔｉｖｅ ｎｅｕｒｏｎｓ ｗｉｔｈｉｎ ｔｈｅ ｂａｓａｌ ｆｏｒｅｂｒａｉｎ ｏｆ ａｄｕｌｔ ｒａｔｓ［Ｊ］．Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ，２ＯＯ６，１４２（４）：１２０９ —１２１９． ［１６］Ｋｒｕｇｌｙａｋｏｖａ ＥＰ，Ｋｈｏｖｒｙａｋｏｖ ＡＶ，Ｓｈｉｋｈａｎｏｖ ＮＰ，ｅｔ ａ１． Ｎｅｓｔｉｎ—ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｔｈｅ ｈｕｍａｎ ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ［Ｊ］． Ｎｅｕｒｏｓｃｉ Ｂｅｈａｖ Ｐｈｙｓｉｏｌ，２００５，３５（９）：８９１—８９７． ［１７］Ｄｒａｐｅａｕ Ｅ，Ｍａｙｏ Ｗ，Ａｕｒｏｕｓｓｅａｕ Ｃ，ｅｔ ａ１．Ｓｐａｔｉａｌ ｍｅｍｏ— ｒｙ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｓ ｏｆ ａｇｅｄ ｒａｔｓ ｉｎ ｔｈｅ ｗａｔｅｒ ｍａｚｅ ｐｒｅｄｉｃｔ ｌｅｖ— ｅｌｓ ｈｉｐｐｏｃａｍｐａｌ ｎｅｕｍｇｅｎｅｓｉｓ［Ｊ］．ＰＡＮＳ，２００３，１００： １４３８５—１４３９０． ［１８］Ｙａｎｇ ＪＷ，Ｃｚｅｃｈ Ｔ，Ｆｅｌｉｚａｒｄｏ Ｍ，ｅｔ ａ１．Ａｂｅｒｒｎａｔ ｅｘｐｒｅｓ— ｓｉｏｎ ｏｆ ｃｙｔｏｓｋｅｌｅｔｏｎ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｉｎ ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ ｆｒｏｍ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｍｅｓｉａｌ ｔｅｍｐｏｒａｌ ｌｏｂｅ ｅｐｉｌｅｐｓｙ［Ｊ］．Ａｍｉｎｏ Ａｃｉｄｓ， ２００６，３０（４）：４７７—４９３． ［１９］Ｌｉｎ Ｈ，Ｓａｎｇｍａｌ Ｍ，Ｓｍｉｔｈ ＭＪ，ｅｔ ａ１．Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ １ ｏｎ ｇｌｏｍｅｒｕｌａｒ ｈｙｄｒａｕｌｉｃ ｐｒｅｓｓｕｒｅ ａｎｄ ｒｅｎｉｎ ｒｅｌｅａｓｅ ｉｎ ｄｏｇｓ［Ｊ］．Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ，１９９３，２１（６ Ｐｔ １）：８４５—８５１． ［２０］Ｊａｃｋｓｏｎ Ｋ，Ｈｅａｄ ＧＡ，Ｍｏｒｉｓ ＢＪ，ｅｔ ａ１．Ｒｅｄｕｃｅｄ ｃａｒｄｉｏ— ｖａｓｃｕｌａｒ ｒｅａｃｔｉｖｉｔｙ ｔｏ ｓｔｒｅｓｓ ｂｕｔ ｎｏｔ ｆｅｅｄｉｎｇ ｉｎ ｒｅｎｉｎ ｅｎｈａｎ— ｃｅｒ ｋｎｏｃｋｏｕｔ ｍｉｃｅ［Ｊ］．Ａｍ Ｊ Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓ，２００７，２０（８）： ８９３—８９９
